Kuhpockenviren (CPXV)haben in vivo und in vitro ein breites Wirtsspektrum und gehören zu den zoonotischen Vertretern der Orthopockenviren (OPV). Am Beispiel von CPXV, das das vollständigste OPV-Genom besitzt, wurde im Rahmen dieses Projektes mit Hilfe eines Gesamtlänge BAC-Klones (BAC = bakterielles artifizielles Chromosom) nach neuen viralen Faktoren gesucht, die für das Wirtsspektrum von Bedeutung sind. Dabei wurde die Technik der gezielten Mutagenese angewendet. Mit dieser Mutagenese-Methode konnte in diesem Pilotprojekt eine universelle und vollständige Bank an definierten Insertions-Mutanten in jedem CPXV-Gen hergestellt werden.
Ergebnisse:
- Reportergen-Expressionskassette, für die einfache Detektion der frühen und der späten Replikationsphase des Virus
- Primär-Bank an Knock-Out-Mutanten
- Finale Mutanten-Bank
Mehrwert: Die im Rahmen dieses Projektes etablierte Mutanten-Bank steht allen Zoonosenforschern zur Verfügung. Die Datenblätter für die einzelnen Mutanten werden in das Portal der Nationalen Forschungsplattform für Zoonosen gestellt.
Ausblick: Das Pilotprojekt konnte Grundlagen schaffen, mit Hilfe derer bereits darauf aufbauende DFG-Projekte durchgeführt werden.
Koordinator: Dr. Tischer (Freie Universität Berlin), Prof. Dr. Klaus Osterrieder (Freie Universität Berlin)
Projektbeginn: 01.01.2012
Förderdauer: 12 Monate (zzgl. kostenneutrale Verlängerung um 5 Monate)
